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技術優勢

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從1981年,Genentech公司Lwan等人首次報道了重組人血清白蛋白cDNA序列,并首次采用色氨酸啟動子構建了第一個重組人血白蛋白的表達載體pHSA,并在大腸桿菌中獲得了成功表達。此后人們對人血白蛋白的結構和表達進行了深入的研究。目前白蛋白基因已經被克隆到細菌、真菌、植物以及動物中進行表達。應用大腸桿菌表達系統表達的rHSA(基因重組人血白蛋白)是一個以甲硫氨酸為N端的人血白蛋白前源蛋白,由于表達產物存在于細胞質中并形成包涵體,需要細胞破壁、分離、復性和純化,因HSA有17.5對二硫鍵,結構復雜,難以正確復性,同時由于HSA分子量較大,在原核生物中表達量不高(毫克級),沒有工業化價值。我們的基因重組技術所使用的酵母來源廣、相對價廉、組成簡單酵母作為真核生物具有能對所表達的蛋白進行翻譯后修飾,易于大規模培養,可將目的產物直接分泌到培養基內,培養基的氧化環境有利于二硫鍵形成和天然構象蛋白質的表達。畢赤酵母作為宿主菌還具有培養方法簡便,內毒素含量低,表達水平高的特點,易于實現工業化。

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