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技術(shù)優(yōu)勢(shì)

所屬分類 : 產(chǎn)品
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從1981年,Genentech公司Lwan等人首次報(bào)道了重組人血清白蛋白cDNA序列,并首次采用色氨酸啟動(dòng)子構(gòu)建了第一個(gè)重組人血白蛋白的表達(dá)載體pHSA,并在大腸桿菌中獲得了成功表達(dá)。此后人們對(duì)人血白蛋白的結(jié)構(gòu)和表達(dá)進(jìn)行了深入的研究。目前白蛋白基因已經(jīng)被克隆到細(xì)菌、真菌、植物以及動(dòng)物中進(jìn)行表達(dá)。應(yīng)用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的rHSA(基因重組人血白蛋白)是一個(gè)以甲硫氨酸為N端的人血白蛋白前源蛋白,由于表達(dá)產(chǎn)物存在于細(xì)胞質(zhì)中并形成包涵體,需要細(xì)胞破壁、分離、復(fù)性和純化,因HSA有17.5對(duì)二硫鍵,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,難以正確復(fù)性,同時(shí)由于HSA分子量較大,在原核生物中表達(dá)量不高(毫克級(jí)),沒有工業(yè)化價(jià)值。我們的基因重組技術(shù)所使用的酵母來源廣、相對(duì)價(jià)廉、組成簡(jiǎn)單酵母作為真核生物具有能對(duì)所表達(dá)的蛋白進(jìn)行翻譯后修飾,易于大規(guī)模培養(yǎng),可將目的產(chǎn)物直接分泌到培養(yǎng)基內(nèi),培養(yǎng)基的氧化環(huán)境有利于二硫鍵形成和天然構(gòu)象蛋白質(zhì)的表達(dá)。畢赤酵母作為宿主菌還具有培養(yǎng)方法簡(jiǎn)便,內(nèi)毒素含量低,表達(dá)水平高的特點(diǎn),易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。

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